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新品推薦:分子生物試劑-電泳—SDS-PAGE凝膠試劑盒原理解析
更新時間:2023-07-26瀏覽:1066次

新品推薦:分子生物試劑-電泳—SDS-PAGE凝膠試劑盒   本生試劑


凝膠回收試劑盒原理解析

一、組成

凝膠回收試劑盒主要由凝膠回收緩沖液、超濾離心管、離心機和悉數(shù)膜組成。其中,緩沖液中含有高濃度的鹽類,濾膜具有極小的分子量截止,這些組成部分起到了關鍵的作用。

二、離心過程

在DNA電泳檢測中,DNA通常經(jīng)過瓊脂凝膠電泳分離。在分離后,我們需要從瓊脂凝膠中回收DNA。具體的步驟是取出瓊脂凝膠條,用剪刀將包含目標DNA帶的條目剪切下來,并將剪切下來的瓊脂凝膠片置于緩沖液中。經(jīng)過一定的溫度和時間,DNA會被溶出,然后把液體置于超濾離心管中。

具體的離心條件是,使用緩沖液在7000-10000rpm的離心條件下離心15-20分鐘。離心過程中,DNA溶解液被壓縮到濾子中,分子量小于濾子孔徑的DNA分子則能通過超濾離心管濾膜被回收。

三、凝膠透析過程

在DNA回收的過程中,目標DNA還夾帶了一定的雜質。為此,需要進行凝膠透析來去除這些雜質。凝膠透析過程中,目標DNA溶液通過凝膠透析小管,在小管中滯留的低分子量物質通過小管碳酸根離子交換基團上的電荷產(chǎn)生交換作用,然后被趨向透析液中。而DNA分子則保留在小管中,到達一定的濃度后在透析液中得到回收。

四、總結

凝膠回收試劑盒的原理主要是通過離心和凝膠透析技術來回收DNA分子。其組成部分包括凝膠回收緩沖液、超濾離心管、離心機和悉數(shù)膜。而具體的步驟則包括將瓊脂凝膠片放置于緩沖液中,進行離心回收,然后通過凝膠透析除去雜物。凝膠回收試劑盒已成為DNA片段回收的工具,具有高效、快速、方便等特點。

SDS-PAGE凝膠試劑盒50T
1.5M Tris-HCl pH8.8100ml
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0.5M Tris-HCl pH6.850ml
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蛋白示蹤上樣緩沖液(5 x)   10ml
彩虹蛋白分子量標準(10-180KD)250μl×1支
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考馬斯亮藍染色試劑盒(常規(guī)法)
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10×Tris-Glycine 電泳緩沖液500ml
10×Tris-Glycine 電泳緩沖液5L
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